T1感受態(tài)細(xì)胞 ,
| 別名: | |||
|---|---|---|---|
| Cas號(hào): | 物化性質(zhì): | ||
| 分子式: | 熔點(diǎn): | ||
| 分子量: | 沸點(diǎn): | ||
| EINECS編號(hào): | 密度: | ||
| MDL號(hào): | 儲(chǔ)存條件: | ||
包裝：20*100ul 100*100ul
產(chǎn)品介紹：Mach1-T1 菌株由野生型 non-K-12 E. Coli W 菌株改造而來，
是目前生長速度較快的感受態(tài)細(xì)胞之一，在 平板上 9 h 可見
克隆，缺失核酸內(nèi)切酶 (endA)，提高了質(zhì)粒 DNA 的產(chǎn)量和質(zhì)
量；重組酶缺陷型 (recA1398)減少插入片段的同源重組概率，
保證了插入 DNA 的穩(wěn)定性；lacZ M15 的存在使 Mach1-T1 可
用于藍(lán)、白斑篩選；tonA 突變賦予 Mach1-T1 菌株對(duì)噬菌體
T1 和 T5 的抗性。
Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞 經(jīng)特殊工藝制作，pUC19 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化
效率>5x108 cfu/μg DNA。
操作步驟：
1.Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，待菌塊
融化，加入目的 DNA（質(zhì)粒或連接 產(chǎn)物）并用手撥打 EP 管底
輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置 25 分鐘。
2.42℃水浴熱激 45 秒，迅速放回冰上并靜置 2 分鐘，晃動(dòng)會(huì)
降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入 700 μl 不含抗生素的無菌2YT 或 LB培養(yǎng)
基，混勻后 37℃，200 rpm 復(fù)蘇 60 分鐘。
4.5000 rpm 離心一分鐘收菌，留取 100 μl 左右上清輕輕吹
打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的 2YT 或 LB 培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于 37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選
操作，將平板放 37℃培養(yǎng)至少 13 h。
注意事項(xiàng):
1.感受態(tài)細(xì)胞最好在冰中緩慢融化。插入冰中 8 分鐘內(nèi)加入目
標(biāo) DNA，不可在冰中放置時(shí)間過長，長時(shí)間 存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效
率。
2.混入目的 DNA 時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于
涂板的菌量。
產(chǎn)品介紹：Mach1-T1 菌株由野生型 non-K-12 E. Coli W 菌株改造而來，
是目前生長速度較快的感受態(tài)細(xì)胞之一，在 平板上 9 h 可見
克隆，缺失核酸內(nèi)切酶 (endA)，提高了質(zhì)粒 DNA 的產(chǎn)量和質(zhì)
量；重組酶缺陷型 (recA1398)減少插入片段的同源重組概率，
保證了插入 DNA 的穩(wěn)定性；lacZ M15 的存在使 Mach1-T1 可
用于藍(lán)、白斑篩選；tonA 突變賦予 Mach1-T1 菌株對(duì)噬菌體
T1 和 T5 的抗性。
Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞 經(jīng)特殊工藝制作，pUC19 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化
效率>5x108 cfu/μg DNA。
操作步驟：
1.Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，待菌塊
融化，加入目的 DNA（質(zhì)粒或連接 產(chǎn)物）并用手撥打 EP 管底
輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置 25 分鐘。
2.42℃水浴熱激 45 秒，迅速放回冰上并靜置 2 分鐘，晃動(dòng)會(huì)
降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入 700 μl 不含抗生素的無菌2YT 或 LB培養(yǎng)
基，混勻后 37℃，200 rpm 復(fù)蘇 60 分鐘。
4.5000 rpm 離心一分鐘收菌，留取 100 μl 左右上清輕輕吹
打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的 2YT 或 LB 培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于 37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選
操作，將平板放 37℃培養(yǎng)至少 13 h。
注意事項(xiàng):
1.感受態(tài)細(xì)胞最好在冰中緩慢融化。插入冰中 8 分鐘內(nèi)加入目
標(biāo) DNA，不可在冰中放置時(shí)間過長，長時(shí)間 存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效
率。
2.混入目的 DNA 時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于
涂板的菌量。
搜索質(zhì)檢報(bào)告(COA)
搜索MSDS
T1感受態(tài)細(xì)胞
